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可見分光光度計(jì)的基本操作,新手不得不看

更新時(shí)間:2023-05-18點(diǎn)擊次數(shù):1145
  可見分光光度計(jì)是一種用于測(cè)量溶液中吸收和透射的光強(qiáng)度的儀器。其工作原理基于比爾-朗伯定律,該定律指出物質(zhì)在特定波長(zhǎng)的光線下吸光度與其在樣品中的濃度成比例。光路由一系列部件組成。Light源通常采用白熾燈或鎢絲燈。這些來(lái)源發(fā)出了大量連續(xù)譜光,并經(jīng)過(guò)凹面反射鏡聚焦到單一聚焦點(diǎn)上。該點(diǎn)發(fā)出的光然后通過(guò)進(jìn)入光柵去除非參考光波長(zhǎng)。光量可調(diào)節(jié)使它達(dá)到所需強(qiáng)度。
 
  目標(biāo)溶液在試管或玻璃杯中放置在一個(gè)透光桶中。(調(diào)制)視樣本容積而改變著的尺寸通常為1厘米,在通道是0.2毫米時(shí)也可能小于這個(gè)數(shù)量外。這對(duì)于獲得準(zhǔn)確而有用的結(jié)果至關(guān)重要。操作者需要校準(zhǔn)設(shè)備以確保利用長(zhǎng)度。樣品通過(guò)后,由光檢測(cè)器接收透射光信號(hào)。并將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)化成電流或電壓輸出。由不同波長(zhǎng)的樣本所吸收的可見光譜區(qū)間提供建立的系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)以及衡量其種類。這只是設(shè)備在計(jì)算,突出顯示或輸出分析結(jié)果時(shí)刻發(fā)揮作用的操作步驟。
 
  和極多數(shù)的實(shí)驗(yàn)室儀器一樣,在硬件部分的工作基礎(chǔ)上還需要軟件來(lái)解決數(shù)據(jù)解讀、優(yōu)化和管理問(wèn)題。分光光度計(jì)通常具有專門的應(yīng)用程序,使得研究人員能夠輕松地準(zhǔn)確識(shí)別溶液中的特定物質(zhì),然后加以定量或用于額外分析。廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全、醫(yī)藥研發(fā)等領(lǐng)域。它可以用來(lái)測(cè)定物質(zhì)吸收或透射不同波長(zhǎng)可見光時(shí)的相對(duì)強(qiáng)度,從而得出樣品中某種化合物的存在濃度。正確選擇和使用可見分光光度計(jì)能夠提高工作效率和檢測(cè)準(zhǔn)確度。
 
  可見分光光度計(jì)的選型經(jīng)驗(yàn)介紹:
 
  測(cè)量范圍:通常具有所謂的線性動(dòng)態(tài)范圍,即在該范圍內(nèi)測(cè)量結(jié)果與樣品濃度成正比。如果需要測(cè)量較高或較低濃度,則要選擇相應(yīng)比較大或小的線性動(dòng)態(tài)范圍的儀器,以避免結(jié)果失真。
 
  分辨率:影響結(jié)果準(zhǔn)確度的一個(gè)因素是分辨率,也就是儀器所能區(qū)分的兩個(gè)信號(hào)之間的差異。分辨率越高,理論上結(jié)果越準(zhǔn)確。一般要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇一款分辨率合適的儀器。
 
  波長(zhǎng)范圍:可見分光光度計(jì)能夠測(cè)量的波長(zhǎng)范圍通常在300~800nm之間,不同儀器的覆蓋范圍有所不同。選擇時(shí)要確認(rèn)需要測(cè)量的化合物的吸收峰是否在可見光波段內(nèi),否則需要考慮其他類型的分析儀器。
 
  自動(dòng)化程度:配備了自動(dòng)清洗和校準(zhǔn)功能,可以提高實(shí)驗(yàn)效率和結(jié)果的準(zhǔn)確度。如果實(shí)驗(yàn)室需要同時(shí)處理大量樣品,這些功能會(huì)非常有用。
 
  軟件支持:部分提供專業(yè)的軟件支持,包括自動(dòng)數(shù)據(jù)記錄、曲線擬合和統(tǒng)計(jì)分析等功能。如果實(shí)驗(yàn)需要生成復(fù)雜的報(bào)告或進(jìn)行后續(xù)分析,選擇擁有適當(dāng)軟件支持的儀器是很重要的。
 

可見分光光度計(jì)

 

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